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細(xì)胞培養(yǎng)物解離是細(xì)胞培養(yǎng)物維持的關(guān)鍵步驟。它涉及將細(xì)胞從其生長(zhǎng)表面分離以進(jìn)行傳代培養(yǎng)或收獲。本節(jié)概述了兩種主要方法：使用無(wú)酶解離緩沖液和使用酶試劑。1.使用無(wú)酶細(xì)胞解離緩沖液該方法非常溫和，無(wú)需使用酶即可保持細(xì)胞完整性：準(zhǔn)備確保所有試劑在使用前加熱至37°C，以避免對(duì)細(xì)胞造成沖擊。去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基：從培養(yǎng)容器中丟棄舊的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。漂洗每個(gè)T75燒瓶或100mm培養(yǎng)皿用5ml不含鈣和鎂的PBS沖洗細(xì)胞單層。在室溫下輕輕搖動(dòng)容器30至60秒。吸出并丟棄沖洗溶液。再次重復(fù)此沖洗步驟。...

Cytion為細(xì)胞系培養(yǎng)提供全面的指南，強(qiáng)調(diào)無(wú)菌和無(wú)菌技術(shù)的重要性。我們的方案可確保在一系列細(xì)胞類(lèi)型和應(yīng)用中成功進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。1.實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要周密的規(guī)劃，以確保在安全高效的環(huán)境中生產(chǎn)高質(zhì)量的材料。最佳設(shè)施包括用于檢疫和處理未受污染材料的不同區(qū)域，每個(gè)區(qū)域都有專(zhuān)用的培養(yǎng)箱。當(dāng)空間不允許按區(qū)域分開(kāi)時(shí)，建議在時(shí)間上分開(kāi)處理不同的材料。嚴(yán)格的清潔方案和至少遵守2類(lèi)密封水平對(duì)于最大限度地降低污染風(fēng)險(xiǎn)和維持受控的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境至關(guān)重要。2.建立無(wú)菌工作空間引擎蓋實(shí)踐：通過(guò)...

PYRODETECT單核細(xì)胞活化試驗(yàn)PyroDetect系統(tǒng)基于人凍存全血和IL1β指數(shù)。大范圍的熱原檢測(cè)：同家兔熱原試驗(yàn)(RPT)一樣，MAT可同時(shí)進(jìn)行有效的內(nèi)毒素和非內(nèi)毒素檢測(cè)。可檢測(cè)產(chǎn)品范圍擴(kuò)大：RPT、細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)(BET)和LAL這些最常使用的方法檢測(cè)的產(chǎn)品類(lèi)型有限，MAT在應(yīng)用靈活性更高。模擬人免疫反應(yīng)的體外檢測(cè)：減少動(dòng)物消耗量的穩(wěn)定可預(yù)知模型。符合國(guó)際法規(guī)和準(zhǔn)則：減少動(dòng)物試驗(yàn)數(shù)量，與行業(yè)和監(jiān)管部門(mén)的倫理趨勢(shì)步調(diào)一致。8個(gè)供體混合的凍存血：最大限度避免與人的熱原...

BiteSizeBio列出了“清理DNA樣本的5種方法”。在某種程度上，這個(gè)總結(jié)是過(guò)時(shí)的并且具有誤導(dǎo)性。讓我們來(lái)看看它們是如何工作的。苯酚-氯仿萃取以去除蛋白質(zhì)。將DNA溶液與苯酚和氯仿混合。水溶性DNA分配到水相中，而蛋白質(zhì)在有機(jī)溶劑存在下變性，從而留在有機(jī)相中。乙醇沉淀脫鹽。在DNA提取中，鹽通過(guò)破壞將核酸固定在一起的蛋白質(zhì)鏈來(lái)釋放DNA鏈。由于DNA不溶于乙醇。在乙醇溶液中，鹽使DNA不易溶于水，同時(shí)有助于保持蛋白質(zhì)（有機(jī)小分子）溶解在水中。結(jié)果是，DNA分子聚集并從溶...

DNA凈化，也稱(chēng)為磁珠凈化，是指從樣品混合物中定向去除小DNA片段，例如引物、接頭和二聚體，用于下游PCR、DNA連接/克隆或DNA文庫(kù)等。有時(shí)，有些人所說(shuō)的DNA凈化可能指的是去除DNA提取過(guò)程中實(shí)際涉及的其他物質(zhì)，例如鹽、蛋白質(zhì)和酶等。我們可以稱(chēng)之為預(yù)清理。因此，現(xiàn)在通過(guò)DNA凈化，我們特別關(guān)注引物、接頭以及由引物或接頭形成的二聚體，因?yàn)樗鼈円彩怯蒁NA寡核苷酸形成的。也就是說(shuō)它們也是DNA片段。當(dāng)這些碎片在樣品中以高比例存在時(shí)。它們可能會(huì)導(dǎo)致各種問(wèn)題并干擾NGS儀器上的...